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MTT实验问题汇总
2013-12-8
实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。2.药物浓度的设定。一定要多看文献,参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据...
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想知道GelRed 核酸染料的特点那就赶紧看看本篇吧
GelRed核酸染料是一种高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它可替代溴化乙锭(EB),并且远高于EB的灵敏度,同时不需要脱色。由于GelRed和EB有相同的光谱特性,因此用它替代EB时不需要更换成像系统。GelRed既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高,并能排除染料对DNA迁移的干扰。使用GelRed进行电泳后染色,操作简单,不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在0.1MNaCl中,并将凝胶置于染色液中,30分钟后就可以观察。染色液在室温...
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2022-05-12
你知道什么是无内毒素质粒小提中量试剂盒么?
无内毒素质粒小提中量试剂盒适用于无内毒素质粒DNA制备。菌体经碱裂解、高盐、低pH处理,质粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。再经内毒素清除液清洗,可将绝大多数菌体内毒素清除干净,然后通过清洗液的清洗可去除蛋白及其他杂质,最后在低盐、高pH条件下洗脱得到高纯度无内毒素的质粒DNA。去内毒素质粒提取试剂盒提取的质粒DNA,可用于常规分子生物学实验外,还适合细胞株的转染实验。质粒(plasmid)是独立于染色体外的双链闭合环状DNA分子,大小范围为0.8~12...
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2022-04-11
PVDF膜因其本身的特性得到了广泛的应用
PVDF膜材加工是在聚酯纤维基布上涂上PVC(聚氯乙烯)树酯后加上100%PVDF(聚偏氟乙烯)表面涂层而成的复合材料。PVDF膜材由于自洁性良好、价格适中、运输安装方便,更广泛应用于各类建筑领域。它的寿命因不同的表面涂层而异,一般可达成10-25年。其构造形式见下图。膜材表面极其重要,表面处理质量不但影响膜材的自洁性能,而且影响膜材使用寿命、抗霉变及抗紫外线性能。目前市场上膜材常用表面处理方式有三种:亚克丽、可焊接PVDF和不可焊接PVDF。亚克丽处理的膜材一般用于帐篷、卡...
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2022-03-08
看完本篇你就知道什么是PVDF膜了
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidenefluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的,膜孔径有大有小,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kda的蛋白选用0.45um的膜,小于20kda的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在使用时需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。PVDF膜具有较高的机械强度,是印迹法中的理想固相支持物材料。PVDF本质是一种疏水性的聚合物,在...
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2022-01-07
对硝酸纤维素膜进行深入讨论和谈一些应用技巧
今天我们对硝酸纤维素膜进行深入讨论和谈一些应用技巧。话不多说下面让我们一起来了解一下吧。1、蛋白与膜的结合原理蛋白与膜的结合原理,已知的结合力包括疏水作用力\H键\静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑。主要有两种假说:1)首先两者靠静电作用力结合,然后靠H键和疏水作用来维持长时间结合。2)首先两者靠疏水作用结合,然后靠静电作用来维持长时间结合。两条假说,都表明其结合过程分为两步,首先结合和后面长时间结合。由于结合原理的不明确性,导致在这方面的工作非常依赖实践...
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2021-12-03
如何选择硝酸纤维素膜?看完本篇你就知道了
如何选择硝酸纤维素膜?是我们经常会遇到的问题是,我是做某某项目的,我该选择那类膜?面对这类问题我们该如何处理呢?下面就让我们一起来了解一下吧。这里涉及到一个膜的分类标准问题,一个供应商可能提供这个膜是8um,但另一个供应商告诉你膜是135s的.这之间的区别与联系是什么?um指的是膜孔径,而从上面膜的生产过程,我们可以看出,膜的孔径实际上是没有办法界定的.由于干燥成型等过程的非绝对均一,膜的孔径也是非均一的。膜孔径的说法实际上是沿用了一直以来的一个形象称呼。而以秒为单位的定义为...
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2021-08-17
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