无血清细胞冻存液不含动物血清成分,能够减少细胞受到污染的风险,提高细胞冻存的安全性,能够有效保护细胞在冻存过程中的存活率,减少冻存损伤,确保细胞复苏后的活性和功能,适用于各种动物及人的细胞系和原代细胞。
无血清细胞冻存液的测定步骤:
-选择处于对数生长期的细胞,用相应的培养基将细胞悬浮起来。
-进行细胞计数,确保细胞数量足够。
-将细胞悬液转移至离心管中,离心(通常800rpm,2分钟)以去除上清液。
-加入适量的无血清培养基或PBS缓冲液,重悬细胞沉淀,再次离心洗涤,以去除残留的培养基和血清成分。
-根据细胞数量,加入适量的无血清细胞冻存液,轻轻吹打混匀,使细胞与冻存液充分接触。
-将含有细胞的冻存液分装至冻存管中,每管体积适中(如500μl-1000μl),并做好标记。
-将冻存管放入-80°C冰箱中保存,约24小时后可转入液氮罐中长期保存。
无血清细胞冻存液的使用注意事项:
-不同的细胞类型可能对冻存液的成分有不同的要求,因此应选择适合目标细胞类型的。
-冻存液的浓度对冻存效果有重要影响,应严格按照产品说明书或实验方案的要求进行配制和使用。
-在操作过程中,应严格遵守无菌操作规范,防止微生物污染。
-使用的冻存管、离心管等耗材应经过严格消毒处理。
-冻存时应控制好降温速度,避免过快或过慢降温导致细胞损伤。
-一般来说,先将冻存管放入-80°C冰箱中预冷一段时间(如24小时),然后再转入液氮罐中长期保存。
-在冻存管上标记好细胞名称、冻存日期等信息,以便后续查找和使用。
-冻存液中可能含有对细胞有毒的成分(如DMSO),在操作过程中应注意个人防护和环境保护。
-避免冻存液接触皮肤和眼睛,如不慎接触应立即用清水冲洗并就医。