RPMI-1640培养基是科研工作者手中的得力助手

　　RPMI-1640培养基不仅是科研工作者手中的得力助手，更是推动生命科学研究不断前进的重要力量。在未来的日子里，随着生命科学领域的不断发展和创新，将继续发挥其重要作用，为人类健康和科技进步贡献更多的力量。
 

　　RPMI-1640培养基在细胞培养过程中的使用：
 

　　1.细胞复苏后的换液
 

　　-当从冻存状态复苏细胞后，细胞接种到含有适量RPMI-1640培养基的培养瓶或培养皿中。一般接种密度根据细胞种类和实验目的有所不同，例如对于贴壁细胞，每平方厘米可能需要接种数千个细胞。
 

　　-细胞接种后，将其放入37℃、CO2培养箱中培养。在细胞复苏后的24小时内，需要观察细胞的贴壁情况和状态。当细胞贴壁后(一般贴壁细胞在接种后几个小时内开始贴壁)，可以更换新鲜的RPMI-1640培养基，以去除复苏过程中可能产生的一些对细胞有害的物质，如冻存保护剂二甲基亚砜(DMSO)。
 

　　2.常规换液
 

　　-根据细胞的生长速度和代谢情况确定换液频率。一般来说，对于生长较快的细胞，可能需要每2-3天换液一次；对于生长较慢的细胞，可以每3-4天换液一次。
 

　　-换液时，小心地吸出旧的培养基，注意不要吸到细胞。然后加入适量的新鲜RPMI-1640培养基，一般以覆盖细胞单层为宜。例如，对于一个T-25培养瓶中的细胞，每次可以加入3-5ml的培养基。
 

　　3.传代培养
 

　　-当细胞生长达到一定的汇合度(例如，贴壁细胞汇合度达到80-90)时，需要进行传代。首先弃去旧的培养基，用适量的磷酸盐缓冲液(PBS)清洗细胞，以去除残留的培养基和细胞代谢产物。
 

　　-加入适量的胰蛋白酶-EDTA消化液(一般根据培养瓶或培养皿的底面积加入适量，如T-25培养瓶可以加入0.5-1ml)，将细胞消化下来。消化时间根据细胞种类和胰蛋白酶的活性而定，一般在室温下消化几分钟，直到细胞变圆、开始脱落。
 

　　-加入含血清(如胎牛血清，终浓度一般为10左右)的RPMI-1640培养基终止消化，然后将细胞悬液转移到离心管中，以适当的转速(如1000rpm，离心5分钟)离心收集细胞。
 

　　-弃去上清液，用适量的RPMI-1640培养基重悬细胞，然后按照合适的比例(如1:2或1:3等)将细胞接种到新的培养容器中，继续培养。