无血清细胞冻存液是一种不含动物血清的培养基

　　无血清细胞冻存液是一种不含动物血清的培养基，用于保存和复苏细胞。可以避免因血清引起的污染风险，提高细胞的存活率和功能稳定性。
 

　　无血清细胞冻存液的测定步骤：
 

　　1.准备材料：首先需要准备好待测的样品，以及必要的实验器材如离心管、移液器等。
 

　　2.细胞计数：在冻存前对细胞进行计数，以确定冻存时的细胞密度。通常建议将细胞密度调整至每毫升含有5×106个细胞左右。
 

　　3.配制冻存液：按照产品说明书或实验室标准操作流程配制无血清细胞冻存液。这可能包括添加特定的冷冻保护剂(如DMSO)和其他成分。
 

　　4.混合细胞与冻存液：将预先准备好的细胞悬浮液缓慢加入已冷却至室温的无血清细胞冻存液中，轻轻混匀以避免产生气泡。
 

　　5.分装与标记：将混合好的细胞悬液分装到无菌的冻存管中，并做好相应的标记，记录下细胞种类、代数、日期等信息。
 

　　6.降温处理：采用程序降温法或直接放入-80°C冰箱中进行快速冷冻。对于某些敏感细胞类型，可能需要更缓慢地降低温度以减少冰晶形成造成的损伤。
 

　　7.长期储存：当所有细胞都被妥善封装后，将其转移到液氮罐中长期保存。确保每个批次都有详细的记录以便追踪管理。
 

　　8.解冻复苏：从液氮中取出所需数量的冻存管，迅速置于37°C水浴锅中融化直至解冻。随后立即转移至新鲜培养基中继续培养观察其生长状态。
 

　　9.评估效果：通过MTT assay或其他方法检测解冻后细胞的活力；同时也可以比较不同条件下(比如有无添加特定因子)细胞的表现差异来验证该配方的效果。