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  • Foline-Phenol福林酚/Sigma/c706/50ml
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    Foline-Phenol福林酚/Sigma/50ml
    福林酚的原理:
    蛋白质与福林酚试剂反应,生成深蓝色复合物,蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。可用分光光度计于500nm波长下进行测定。与标准曲线对照,而确定蛋白质含量。试剂中的 W6+在碱性条件下,与体系中存在的酚羟基发生反应,得到呈现蓝色的W5+。
    福林酚的应用:
    福林酚适用于对体系中存在酚羟基化合物其含量的比色法、分光光度法。用于蛋白质

    福林酚的操作方法:

    1、标准曲线的制作:   取14支试管分成两组,分别加入0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL标准蛋白质溶液(250μg/mL),用水补足到1mL,加入5mL试剂甲,混匀,于20-25℃放置10分钟,再加入0.5mL试剂乙,立即摇匀,在20-25℃保温30分钟,然后于500nm处比色。测定光密度值,取两组测定的平均值,以蛋白质浓度为横座标,光密度值为纵座标,绘制标准曲线值为定量的依据。

    2、样品测定:    取1mL样品溶液(约合20-250μg/多肽或蛋白质)加入5mL试剂甲混匀,于20-25℃放置10分钟,再加0.5mL试剂乙(Folin-酚),立即摇匀,在20-25℃保温30分钟,然后于500nm处比色,以1mL水代替样品作空白对照。测定后,可以在标准曲线中查出未知样品的浓度。若用0.5cm光程的比色杯进行比色,可按下面方法进行操作:取0.2mL样品溶液(约含5-100μg多肽或蛋白质)加入1mL试剂甲(可选用0.3-0.5cm直径的小试管)混匀,10分钟以后,再加入0.1mL试剂乙 ,立即混匀,30分钟后比色。一般来说,若多肽或蛋白质的浓度在2-25μg,测波长755nm,,而25μg以上则采用500nm比色为宜。

    使用福林酚的注意事项:

    1、FolIn试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物,均有干扰作用。

    2、福林酚仅在酸性条件下稳定,所以加入试剂乙后要立即混匀,在试剂乙被破坏之前完成反应,否则显色程度减弱。用该方法测定蛋白浓度会受到蛋白质的特异性影响,即不同蛋白质因络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有不同,标准曲线也不是严格的直线形式。

    北京索莱宝科技有限公司是生化试剂供应商,专业生产销售生化试剂、生物试剂、细胞培养基、实验耗材等产品。福林酚为索莱宝自产产品,其货号为F8060。

     

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