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  • 胰蛋白酶-EDTA消化液C0560-719
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    胰蛋白酶-EDTA消化液C0560-719是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。

    胰蛋白酶-EDTA消化液C0560-719

    液体,含酚红,含0.5g/L胰蛋白酶,0.02%EDTA
    产品规格100ml

    保存条件        保质期
    -20℃    12个月

    胰蛋白酶-EDTA消化液C0560-719

    产品说明:

    在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。

    保存:-20℃保存,有效期12个月。

    使用方法:

    1. 贴壁细胞的消化:

    a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

    b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

    c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

    d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

    e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

    2. 组织的消化:

    不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

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