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牛转铁蛋白在无血清细胞培养过程中发挥重要功能

更新时间:2021-02-01  |  点击率:836
  牛转铁蛋白为无血清培养基必需添加物组分,通过与转铁蛋白受体(Transferrin Receptor, TfR) 相互作用,在无血清细胞培养过程中发挥重要功能。
 
  转铁蛋白能与三价铁离子可逆性结合,调节铁离子转运及代谢,维持细胞内的铁平衡。
 
  我们对转铁蛋白的转铁作用都很了解,但其实它重要的意义在于维持细胞的生长和增殖,也就是说它有类似于生长因子的功能。
 
  而且,转铁蛋白也是一种重要的胞外抗氧化剂,可以避免细胞外环境中自由基的产生,防止细胞受到伤害。
 
  牛转铁蛋白是血浆中主要的铁传递蛋白,为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。研究发现所有的细胞生长都离不开转铁蛋白。
 
  不但维持正常的细胞代谢依赖于以生物活性形态存在的铁,铁还是一些酶的辅助因子,比如RNA聚合酶,DNA合成酶。同时也是血红蛋白的重要组成部分。
 
  转铁蛋白是血浆糖蛋白,从血浆中分离而来,牛转铁蛋白以两种分子形态存在,即分子量分别为74KD和78KD。
 
  每个转铁蛋白分子通过C端和N端结构位点可以结合两分子铁离子,所以转铁蛋白以三种形态存在:脱铁(不结合铁离子),饱和铁(结合两分子铁离子)和部分饱和,在生理情况下,转铁蛋白分子仅有1/3被铁饱和。
 
  转铁蛋白对于绝大部分细胞系在无血清培养基中生长是必需的,研究表明饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是有效的形态。对于杂交瘤,黏连细胞和悬浮细胞系,在细胞培养过程中,应保持培养基中转铁蛋白浓度在0.5-100μg/ml。针对不同的细胞系,需要选择合适的浓度。
 
  保存温度(Storage Temperature):
 
  转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下,使用之前再溶解。一般用PBS或者其它合适的溶剂在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液,浓度在0.5-2.0mg/ml,然后用无菌滤膜进行过滤,滤液可在无菌条件下2-8℃保存30天,长期保存请分装后存放于-80℃。